产品概述
人血管细胞间粘附分子-1(VCAM-1) 是一个由715个氨基酸组成的I型转膜糖蛋白,分子量100到110KD,其分子内还存在着七个C2型免疫球蛋白区。它的细胞外结构是674个氨基酸多肽,随后还有一个22个氨基酸的转膜区和一个19个氨基酸的细胞内结构。在它的细胞外结构存在着多个N-型糖基化位点,因此它的细胞外机构分子量可以增加到80KD左右(非糖基化分子量大约为74.14KD)。 此外, 每个C2型免疫球蛋白区之间是由一个二硫键所连接起来。人血管细胞间粘附分子-1和大、小鼠的种属同源性在75%左右。但是,长度为19个氨基酸的细胞内尾巴结构在人、小鼠、大鼠之间是保守的。此外,小鼠表达的血管细胞间粘附分子-1,可以结合到小鼠和人的白细胞。说明小鼠和人的血管细胞间粘附分子-1具有类似的功能结构区或同源性。研究资料显示, 血管细胞间粘附分子-1也有分子变异现象,比如人的血管细胞间粘附分子-1可以有六个C2型免疫球蛋白区, 而家兔可以发现8个C2型免疫球蛋白区的变异分子。
产品原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人VCAM-1单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的VCAM-1会与单抗结合形成免疫复合物,游离的成分被洗去;加入生物素化的抗人VCAM-1抗体,生物素化抗人VCAM-1抗体与酶标板上结合的标准品或样本中的VCAM-1结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去;加入辣根过氧化物酶标记的亲合素,亲合素与生物素特异性结合,游离的成分被洗去。加入显色底物(显色剂),若反应孔中有VCAM-1,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂变蓝,加终止液变黄。在450nm处测OD值, VCAM-1浓度与OD450值之间呈正相关,可通过绘制标准曲线求出标本中VCAM-1浓度。
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