产品概述
RANTES(Regulated upon Activation, Normal T cell Expressed andpresumably Secreted),也称为CCL5,是趋化因子“CC”亚家族的一个成员,通过趋化白细胞以及调节这些细胞的功能从而在炎症免疫应答中发挥其主要作用。人RANTES cDNA编码一个高度碱性的含91个氨基酸残基的多肽前体,该多肽前体含一个23个氨基酸残基的疏水性信号肽,切除该信号肽后产生含68个氨基酸残基的成熟蛋白。在推断的氨基酸水平上,人RANTES和小鼠RANTES的同源性大约为85%。 RANTES对多种不同种类的细胞都具有强力趋化作用,这些细胞包括未刺激的CD4+/CD45RO+记忆性T细胞、刺激过的初始和记忆性CD4+和CD8+T细胞、NK细胞、噬碱性粒细胞、噬酸性粒细胞、树突状细胞、肥大细胞、单核细胞和小胶质细胞。除了对细胞迁移的影响外,RANTES还能活化多种细胞,包括T细胞、单核细胞、中性粒细胞、NK细胞、树突状细胞和星型胶质细胞。
产品原理
本实验采用双抗体夹心ELISA法。抗人CCL5/Rantes单抗包被于酶标板上,标本和标准品中的CCL5/Rantes会与单抗结合形成免疫复合物,游离的成分被洗去;加入生物素化的抗人CCL5/Rantes抗体,生物素化抗人CCL5/Rantes抗体与酶标板上结合的标准品或样本中的CCL5/Rantes结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去;加入辣根过氧化物酶标记的亲合素,亲合素与生物素特异性结合,游离的成分被洗去。加入显色底物(显色剂),若反应孔中有CCL5/Rantes,辣根过氧化物酶会使无色的显色剂变蓝,加终止液变黄。在450nm处测OD值,CCL5/Rantes浓度与OD450值之间呈正相关,可通过绘制标准曲线求出标本中CCL5/Rantes浓度。
产品性能
1. 灵敏度:最小可测人CCL5/Rantes达7pg/ml 。
2. 重复性:板内、板间变异系数均<10%。
产品组分及储存条件
名称
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96 Tests
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48 Tests
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保存条件
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1. 抗体包被板条 (Microwell Plate)
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8×12
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8×6
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2-8℃
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2.标准品 (Standard)
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2 支(冻干)
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1 支(冻干)
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2-8℃
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3.浓缩生物素化抗体 100× (Biotin-Conjugate)
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2 支 (60μl/支)
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1 支(60μl/支)
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2-8℃
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4.浓缩酶结合物 100× (Streptavidin-HRP)
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2 支 (60μl/支)
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1 支(60μl/支)
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2-8℃(避光)
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5.试剂稀释液 (Assay Diluent)
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4 瓶(25ml/瓶)
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2 瓶(25ml/瓶)
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2-8℃
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6.浓缩洗涤液 20× (Wash Buffer Concentrate)
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1 瓶 (30ml/瓶)
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1 瓶(30ml/瓶)
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2-8℃
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7.显色剂 (Substrate Solution)
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1 瓶(12ml/瓶 )
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1 瓶(6ml/瓶)
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2-8℃(避光)
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8.终止液 (Stop Solution)
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1 瓶(12ml/瓶)
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1 瓶(12ml/瓶)
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2-8℃
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9.封板胶纸
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3 张
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2 张
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10.说明书
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1 份
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1 份
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试验所需自备仪器和试剂:
1. 酶标仪(450nm检测波长滤光片,570nm或630nm校正波长滤光片)。
2. 高精度加液器及一次性吸头:0.5-10μl,2-20μl,20-200μl,200-1000μl。
3. 37℃恒温箱、蒸馏水或去离子水、坐标纸。
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